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    懂了這些ELISA技術(shù)點(diǎn)你就入門(mén)了

    發(fā)布時(shí)間: 2017-01-03  點(diǎn)擊次數(shù): 1106次

    ELISA試劑盒為了得到非常好的試驗(yàn)作用,一些試驗(yàn)菜鳥(niǎo)們還需多加了解技能內(nèi)容,公司每周都會(huì)為您精心拾掇出關(guān)鍵技能方法,能夠熟練的把握好這些往后再應(yīng)用到試驗(yàn)里面就會(huì)簡(jiǎn)略的多。今天的主要內(nèi)容ELISA試劑盒的一些技能關(guān)鍵:
    樣本加樣方法
    1、細(xì)胞上清:前處理有必要是細(xì)胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時(shí),用規(guī)范品稀釋液直接稀釋。
    2、腦脊液:前處理有必要是細(xì)胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時(shí),用規(guī)范品稀釋液直接稀釋。
    3、血清血漿:請(qǐng)參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標(biāo)本,如稀釋量大,請(qǐng)將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加,短少部分用規(guī)范品稀釋液抵償至100ul。
    4、安排勻漿液的樣本,要制備過(guò)程中需要在緩沖液中參加蛋白酶抑制劑,避免蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解,構(gòu)成檢查作用的值偏低。
    ELISA試劑盒因安排勻漿液的樣本蛋白品種多,含量豐富,試驗(yàn)參照血清血漿標(biāo)本的處理方法進(jìn)行,不然就會(huì)影響試驗(yàn)作用。詳細(xì)是參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標(biāo)本,需稀釋時(shí),請(qǐng)將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加,短少部分用規(guī)范品稀釋液抵償至100ul。
    A.血清標(biāo)本應(yīng)是天然凝集后,取上清,避免在冰箱中凝集血液;
    B.血漿標(biāo)本,推薦用EDTA的方法搜集若待測(cè)樣本不能及時(shí)檢查,標(biāo)本搜集后請(qǐng)分裝,凍存于-20℃,避免重復(fù)凍融。
    C.血清標(biāo)本不該增加任何防腐劑或抗凝劑;
    D.標(biāo)本應(yīng)明澈通明,檢查前樣本中如有懸浮物應(yīng)經(jīng)過(guò)離心去掉。
    E.請(qǐng)勿運(yùn)用溶血,高血脂或污染的標(biāo)本檢查,不然作用將不準(zhǔn)確。
    ELISA試劑盒由于政策蛋白不一樣,或許構(gòu)成降解的蛋白類型或許不一樣,假定試驗(yàn)前經(jīng)過(guò)文獻(xiàn)判定用哪種蛋白酶抑制劑,有針對(duì)性參加,可節(jié)省抑制劑。假定查不到有關(guān)文獻(xiàn),可采用組合抑制的方法保證蛋白不易被降解。

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